DNA பிரித்தெடுத்தல்
Isolation of DNA
DNA என்பது செல் சுவர்களால் பாதுகாக்கப்படுகிறது, பிளாஸ்மா சவ்வு மட்டும் அல்ல. சரியான நொதியைத் தேர்ந்தெடுக்கத் தவறினால், உங்களுக்குக் கிடைக்கும் விளைச்சல் பூஜ்ஜியம். இதுவே அனைத்து மறுசேர்க்கை DNA தொழில்நுட்பத்தின் அடிப்படைத் தடை.
கருத்து விளக்கம்
செல் சுவரை உடைக்க குறிப்பிட்ட நொதிகளைப் பயன்படுத்தி பிரித்தெடுத்தல் தொடங்குகிறது: பாக்டீரியாவிற்கு லைசோசைம், தாவரங்களுக்கு செல்லுலேஸ், பூஞ்சைகளுக்கு கைட்டினேஸ். இந்தச் செரிமானம் DNA-வை RNA, புரதங்கள் மற்றும் லிப்பிட்களுடன் வெளியேற்றுகிறது. ரிபோநியூக்ளியேஸ் மூலம் RNA-வும், புரோட்டீயேஸ் மூலம் புரதங்களும் நீக்கப்படுகின்றன. இறுதியில், குளிர்ந்த எத்தனால் சேர்க்கப்பட்டு சுத்திகரிக்கப்பட்ட DNA இழைகளாக வீழ்படிவாக்கப்படுகிறது.
இது ஏன் முக்கியம்
ரெஸ்ட்ரிக்ஷன் என்சைம்கள் செயல்படுவதற்கு, புரதங்கள், RNA மற்றும் லிப்பிட்கள் இல்லாத தூய வடிவில் DNA இருக்க வேண்டும்.
NEET பார்வை
NEET தேர்வில் நொதி-உயிரி பொருத்தத்திற்கு முக்கியத்துவம் அளிக்கப்படுகிறது. இதை மனப்பாடம் செய்யுங்கள்: பாக்டீரியா-லைசோசைம், தாவரம்-செல்லுலேஸ், பூஞ்சை-கைட்டினேஸ். வீழ்படிவாக்கப் பயன்படுவது குளிர்ந்த எத்தனால் மட்டுமே என்பதை நினைவில் கொள்ளுங்கள்.
மருத்துவ முக்கியத்துவம்
மருத்துவ மூலக்கூறு உயிரியலில், மைக்கோபாக்டீரியம் டியூபர்குளோசிஸ் போன்ற நோய்க்கிருமிகளைக் கண்டறியும் PCR சோதனைக்கு இதுவே அடிப்படை. DNA பிரித்தெடுத்தல் முழுமையடையவில்லை என்றாலோ அல்லது அசுத்தங்கள் கலந்திருந்தாலோ, PCR வினை தோல்வியடைந்து தவறான எதிர்மறை மருத்துவ முடிவுகளைத் தரும்.
விரிவான குறிப்புகள் (ஆங்கிலத்தில்)
Introduction
To cut DNA with restriction enzymes, it must first be obtained in pure form, free from other macromolecules.
Core concept
Steps (NCERT): since DNA is enclosed within membranes, cells are broken open using enzymes — lysozyme (bacteria), cellulase (plant cells), chitinase (fungus). Genes are located on long DNA molecules interwined with proteins such as histones. RNA is removed by treatment with ribonuclease, and proteins with protease. Other molecules can be removed by appropriate treatments, and purified DNA finally precipitates out after the addition of chilled ethanol. This can be seen as a collection of fine threads in the suspension. Once pure DNA is obtained, it is cut with restriction enzymes, and the cut DNA is checked by agarose gel electrophoresis.
Go deeper
Each enzyme matches the cell wall it must break: lysozyme for the bacterial cell wall, cellulase for plant cell walls (cellulose), chitinase for fungal walls (chitin).
From Class 10
To study DNA, scientists first break open cells and wash away everything else until only the DNA remains as white threads.