செருகல் செயலிழப்பு
Insertional Inactivation
பெரும்பாலான மாணவர்கள் ஆன்டிபயாடிக் எதிர்ப்பு குறிப்பான்களுக்கும் குரோமோஜெனிக் அடி மூலக்கூறுகளுக்கும் இடையிலான வேறுபாட்டைப் புரிந்துகொள்வதில்லை. உங்கள் மறுசீரமைப்பு DNA, lacZ மரபணுவைச் சிதைத்தால், நீங்கள் நொதியை இழக்கிறீர்கள், காலனியை அல்ல. தேர்வு செய்வதில் துல்லியம் இருந்தால் மட்டுமே மருத்துவக் கல்லூரி இடம் உறுதி.
கருத்து விளக்கம்
இன்செர்ஷனல் இனாக்டிவேஷன் என்பது ஒரு நொதியின் குறியீட்டு வரிசையில், பொதுவாக பீட்டா-கேலக்டோசிடேஸில், வெளிநாட்டு DNA-வைச் செருகும் ஒரு தேர்வு முறையாகும். இந்தச் செருகல் மரபணுவைச் செயலிழக்கச் செய்கிறது. குரோமோஜெனிக் அடி மூலக்கூறைச் சேர்க்கும்போது, மறுசீரமைப்பு அல்லாத காலனிகள் நீல நிறத்தை உருவாக்குகின்றன. மறுசீரமைப்பு காலனிகள் வெள்ளை நிறத்தில் தோன்றும், ஏனெனில் நொதி செயலிழந்துவிடும்.
இது ஏன் முக்கியம்
இது ஆன்டிபயாடிக் தட்டுகளைப் பயன்படுத்தாமல், மறுசீரமைப்பு மற்றும் மறுசீரமைப்பு அல்லாத செல்களை வேறுபடுத்திக் காட்ட ஒரு காட்சி அடையாளத்தை வழங்குகிறது.
NEET பார்வை
NEET தேர்வில் நிற மாற்றத்தில் கவனம் செலுத்துங்கள்: மறுசீரமைப்பு காலனிகள் வெள்ளை, மறுசீரமைப்பு அல்லாதவை நீலம். இதை ஆன்டிபயாடிக் எதிர்ப்புத் தேர்வு முறையுடன் குழப்பிக் கொள்ளாதீர்கள். தேர்வாளர்கள் பெரும்பாலும் பொருத்துக வினாக்களில் இந்த இரண்டையும் மாற்றி வைப்பார்கள். இதை மனப்பாடம் செய்யுங்கள்: 'வெள்ளை = மறுசீரமைப்பு' என்பது மாறாத விதி.
மருத்துவ முக்கியத்துவம்
இந்த நுட்பமே மறுசீரமைப்பு இன்சுலின் மற்றும் தடுப்பூசிகளைத் தயாரிப்பதற்கான அடித்தளம். இந்தத் தேர்வு முறை தோல்வியுற்றால், மறுசீரமைப்பு அல்லாத பாக்டீரியாக்கள் கலவையில் கலந்து, மருந்து வீரியத்தை இழக்கும். மருத்துவ நடைமுறையில், நோயாளியின் பாதுகாப்பிற்கு மறுசீரமைப்புப் பொருளின் தூய்மை மிக முக்கியம்.
விரிவான குறிப்புகள் (ஆங்கிலத்தில்)
Introduction
Insertional inactivation is a way to tell recombinant from non-recombinant cells: inserting foreign DNA inside a gene of the vector switches that gene off.
Core concept
In pBR322: foreign DNA ligated at the BamHI site of the tetracycline resistance gene (tetR) inactivates it — recombinants lose tetracycline resistance but still grow on ampicillin; foreign DNA at the PvuI or PstI site of the ampicillin resistance gene (ampR) inactivates ampicillin resistance. Recombinants are identified by replica plating onto media with each antibiotic. Because selecting recombinants through antibiotic inactivation is cumbersome (simultaneous plating on two plates), alternative markers were developed: in the blue-white method, the foreign DNA is inserted within the coding sequence of the enzyme beta-galactosidase. Non-recombinant colonies, with an active enzyme, give blue colour in the presence of a chromogenic substrate; recombinant colonies, in which the gene is inactivated, give no colour (white).
Go deeper
Blue-white selection is quicker because recombinants can be seen directly on a single plate.
From Class 10
If you paste a new paragraph into the middle of a sentence, that sentence stops making sense. Inserting DNA into a gene does the same — the gene stops working.