குளோனிங் தளங்கள்
Cloning Sites
ஒரு வெக்டாரில் பல அங்கீகார தளங்கள் (recognition sites) இருப்பது உங்கள் குளோனிங் சோதனையின் தோல்விக்கு சமம். ஒரு ரெஸ்ட்ரிக்ஷன் என்சைம் பிளாஸ்மிடை ஐந்து வெவ்வேறு இடங்களில் வெட்டினால், உங்களுக்கு ஐந்து துண்டுகள் கிடைக்கும், பயனுள்ள ரீகாம்பினன்ட் வெக்டார் கிடைக்காது. தளங்களைத் தேர்ந்தெடுப்பதில் உள்ள துல்லியமே ஒரு வெற்றிகரமான மாற்றத்திற்கும், வீணான ஆய்வக நேரத்திற்கும் இடையிலான வேறுபாடு.
கருத்து விளக்கம்
வெக்டார்கள் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் ரெஸ்ட்ரிக்ஷன் என்சைம்களுக்கு ஒரே ஒரு அங்கீகார தளத்தைக் கொண்டிருக்க வேண்டும். பல தளங்கள் இருந்தால், அவை பல DNA துண்டுகளை உருவாக்கி, வேற்று DNA-வைச் செருகுவதை சிக்கலாக்கும். வேற்று மரபணுவின் இணைவு (Ligation) இந்த குறிப்பிட்ட ரெஸ்ட்ரிக்ஷன் தளங்களில் மட்டுமே நிகழ்கிறது. இது குளோனிங் செயல்முறையின் போது வெக்டாரின் ஒருமைப்பாட்டை உறுதி செய்கிறது.
இது ஏன் முக்கியம்
வெக்டர் ஒருமுறை மட்டுமே வெட்டப்படுவதை இது உறுதி செய்கிறது, இது வெக்டரின் அமைப்பைச் சிதைக்காமல் வெளிநாட்டு DNA-வை துல்லியமாகச் செருக அனுமதிக்கிறது.
NEET பார்வை
NEET தேர்வில் ஒற்றை தளங்களின் அவசியம் குறித்த கேள்விகள் அதிகம் வரும். பல தளங்கள் ஏன் தவிர்க்கப்பட வேண்டும் என்று கேட்டால், 'குளோனிங் செயல்முறை சிக்கலாகும்' என்பதே சரியான விடை. லிகேஷன் இந்த குறிப்பிட்ட தளங்களில் மட்டுமே நடக்கும் என்பதை மனப்பாடம் செய்யுங்கள். அங்கீகார தளங்களையும் (recognition sites), தேர்ந்தெடுக்கக்கூடிய குறிப்பான்களையும் (selectable markers) குழப்பிக்கொள்ளாதீர்கள்.
மருத்துவ முக்கியத்துவம்
மரபணு சிகிச்சையில், ஒற்றை மற்றும் குறிப்பிட்ட தளத்தைக் கொண்ட வெக்டாரைப் பயன்படுத்தத் தவறினால், அது செயல்படாத புரதங்கள் அல்லது முழுமையற்ற மரபணு விளைபொருட்களை உருவாக்கும். SCID போன்ற மரபணு கோளாறுகள் உள்ள நோயாளிகளின் குறைபாடுள்ள மரபணுவை மாற்ற முயற்சிக்கும்போது இது பேரழிவை ஏற்படுத்தும். வெக்டார் வடிவமைப்பில் உள்ள துல்லியமே மூலக்கூறு மருத்துவத்தின் அடித்தளம்.
விரிவான குறிப்புகள் (ஆங்கிலத்தில்)
Introduction
Cloning sites are the recognition sites in a vector where foreign DNA is ligated. A vector should have very few, preferably single, recognition sites for the commonly used restriction enzymes.
Core concept
Presence of more than one recognition site within the vector will generate several fragments, which will complicate gene cloning. Ligation of alien DNA is carried out at a restriction site present in one of the two antibiotic resistance genes (e.g. BamHI in tetR of pBR322), enabling selection of recombinants by insertional inactivation.
Go deeper
Single sites mean the vector is opened in only one place, so the foreign DNA goes in exactly where you want it.
From Class 10
When you want to insert a new page in a book, you open it at one spot — not tear it into many pieces. Cloning sites are that one spot.